别让抗体白存！小鼠单克隆抗体的科学保存法则，一文说透

　　小鼠单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的、针对特定抗原表位的高度均一性抗体，具有特异性强、亲和力高和批次间一致性好等优点。自1975年Köhler和Milstein建立杂交瘤技术以来，小鼠成为制备单克隆抗体z常用的实验动物之一，在基础研究、疾病诊断、药物开发及免疫治疗等领域发挥着重要作用。

　　小鼠单克隆抗体的保存条件对其活性、稳定性和使用寿命至关重要。综合相关技术资料，其保存方法主要涵盖温度控制、分装策略、缓冲体系及操作规范等几个核心维度：

　　一、 温度控制与长期保存

　　长期冷冻保存：未使用的小鼠单克隆抗体通常建议在 -20℃ 条件下长期保存。对于部分在液态下相对不稳定的抗体，也可采用冻干(Lyophilisation)处理，在干燥状态下可保存3至5年而不失活。

　　避免无霜冰箱：切勿将抗体存放在具有自动除霜功能的无霜冰箱(frost-free freezer)中。此类冰箱为防止结霜会频繁改变温度，反复的温度波动对抗体极为不利。

　　短期保存：如果抗体在短期内(如1-2周)即将再次使用，可将其置于 4℃ 冰箱中保存。室温下存放易引起抗体降解或因微生物生长导致失活，应严格避免。

　　二、 分装与避免反复冻融

　　小量分装（Aliquots）：在s次收到抗体或解冻后，强烈建议将其分装成小份(每份体积建议不小于10 μl)。小分装可以大程度地减少反复冻融带来的损伤。

　　严禁反复冻融：反复的冻融循环会导致抗体发生变性并形成聚集体(aggregates)，严重损害抗体活性。一旦抗体解冻，绝对不能再次冷冻;若当次实验有剩余，应直接置于4℃保存。

　　三、 缓冲液与添加剂的作用

　　商品化的小鼠单克隆抗体通常保存在特定的缓冲液中，以维持其稳定性：

　　防腐剂：缓冲液中常添加 0.02% 叠氮h钠（Sodium azide） 等防腐剂，用于抑制细菌和微生物的生长，保证抗体稳定。

　　稳定剂：部分抗体会添加 50% 甘油 或蔗糖(Sucrose)等保护剂。甘油能降低溶液的冰点并防止冰晶形成，从而保护抗体结构。注意：含有50%甘油的抗体溶液在-20℃下仍保持液态，切勿放入-80℃冰箱以免冻结。

　　蛋白载体：缓冲液中可能含有 0.05% BSA（牛血清白蛋白），有助于稳定抗体并减少其在管壁上的非特异性吸附。

　　四、 稀释抗体的回收与保存

　　稀释液保存：使用一抗稀释液稀释后的小鼠单克隆抗体，若当次实验未用完，可以回收并在 4℃ 条件下保存。

　　重复使用次数：回收的稀释抗体通常可重复使用5-10次(效价高的抗体至少可重复利用3次并保存1周左右)。

　　异常处理：回收的抗体在重复使用过程中若出现轻微浑浊，可通过10.000×g离心1-3分钟后取上清使用;若出现明显絮状物或长霉长菌，则应废弃。

　　五、 其他注意事项

　　避光保存：紫外线会改变蛋白质中的氨基酸残基。若小鼠单抗偶联了荧光基团、酶或生物素，必须使用避光暗瓶保存并远离阳光直射。

　　高浓度保存：蛋白质在较高浓度下更不易降解，因此在保存时应尽量保持抗体的原始高浓度，避免提前稀释。

　　安全防护：小鼠单克隆抗体仅限专业科研使用。由于其中可能含有叠氮h钠等有毒防腐剂，操作时请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。